采用部分重疊引物設計，使PCR呈指數擴增，擴增產物凝膠電泳可見；擴增產物為環狀，易于轉化。DMT酶消化體外降解非突變型質粒模板(甲基化質粒模板)和DMT感受態細胞體內降解非突變型質粒模板(甲基化質粒模板)，從而有效地篩選突變克隆。
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